產(chǎn)品信息
CD4+ T 細(xì)胞（CD4+ T Cells）
PB01
凍存株 1 管，2 X 10
6
cells/管
陰選
產(chǎn)品描述
? 使用非接觸的免疫磁珠標(biāo)記單個核細(xì)胞，從中分離獲得 CD4+ T 細(xì)胞。
? 本產(chǎn)品經(jīng)過細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞純度、細(xì)胞活力、細(xì)菌和真菌檢測，提供細(xì)胞流式鑒定圖和完整的
質(zhì)量檢測報告，保證產(chǎn)品質(zhì)量。
產(chǎn)品保存
? 收到產(chǎn)品后，檢測產(chǎn)品是否有破損及是否處于凍存狀態(tài)。若處于凍存狀態(tài)，立即放置于-80℃
的深低溫冰箱（＜1 個月）或液氮（＞1 個月）中保存；若出現(xiàn)問題，請及時拍照記錄并向廠
家反饋情況再進(jìn)行廢棄。
? 收到產(chǎn)品后，請按要求放置至少 3d 后再進(jìn)行復(fù)蘇操作，以保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性和細(xì)胞活率。
注意事項(xiàng)
★ 在無菌條件下處理本產(chǎn)品；
★ 儲存于液氮中的凍存管有爆管的可能，請仔細(xì)閱讀說明書中的復(fù)蘇流程；
★ 本產(chǎn)品僅限科研使用，請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療；
★ 請按照受污染的生物標(biāo)本原則來處理本產(chǎn)品，以保證產(chǎn)品的安全性。
培養(yǎng)條件
完全培養(yǎng)基：IMDM/DMEM/RPMI-1640＋10%滅活的 FBS
產(chǎn)品復(fù)蘇
1. 開啟水浴鍋至 37℃, 提前預(yù)熱完全培養(yǎng)基。
2. 從液氮中取出細(xì)胞，用 70%酒精棉球擦拭凍存管表面，隨后在生物安全柜中適度擰松管蓋，平衡
氣壓后，再擰緊。
3. 在 37℃水浴鍋中快速解凍細(xì)胞，不停晃動并查看，當(dāng)凍存管中只剩少量冰晶時即可停止。
a) 盡可能避免水沒過凍存管帽，建議用鑷子夾住凍存管連續(xù)晃動，以降低污染的風(fēng)險。
b) 2min 內(nèi)務(wù)必完成細(xì)胞復(fù)蘇過程，時間過久會導(dǎo)致復(fù)蘇細(xì)胞活率較差。
4. 待細(xì)胞凍存液完全解凍，用 70%酒精棉擦拭凍存管的外壁后拿入生物安全柜，開蓋后吹勻細(xì)胞懸
液，取 10μL 用于細(xì)胞計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)方法：按照 1:1 與臺盼藍(lán)混合后使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，或按照
計(jì)數(shù)儀使用說明進(jìn)行計(jì)數(shù)，記錄細(xì)胞活力和細(xì)胞密度。
5. 將剩余細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至 50mL 離心管中，并用 1mL 完全培養(yǎng)基潤洗凍存管，收集殘留的細(xì)胞。
6. 緩慢滴加 15-20mL 完全培養(yǎng)基至高濃度細(xì)胞懸液中（約 1mL/秒），同時晃動離心管，完全混勻
后在室溫下離心 300g、15min。
7. 離心后轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中，暫時不要丟棄，以免細(xì)胞未完全收集而造成較大損失。
8. 按需加入新鮮的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并再次計(jì)數(shù)，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
若需再次洗滌細(xì)胞，則重復(fù)步驟 6-8，每次洗滌會造成 10-15%的細(xì)胞損失。
若離心后細(xì)胞數(shù)量低于預(yù)期，請將步驟 7 的上清液離心 500g、15min，再次收集。
使用過程中有任何問題請及時與我們聯(lián)系！